说起生物医药科研界的让人撕心裂肺的实验,动物实验肯定是其中一大块。裸鼠成瘤,各种疾病造(zuo)模(nie),让我们饱尝与鼠小弟的相爱相杀。
既然有牺牲,除了有尊严,还得有价值。如何让鼠小弟们的牺牲换来的数据逼格更高?自然少不了时下最火爆的动物体内基因转染技术。
之前一篇文章里,老蔡曾跟大家分享了如何用AAV(腺相关病毒)实现精准且高效的动物靶器官基因转染(点击可直接查看),收到了不少亲的回复,希望能结合AAV的使用,讲一讲如何在各个脏器中进行AAV的活体注射。
其实,多脏器注射方式,说难也确实难,说不难也确实不难。
难!这么多脏器,这么多方法,都是精细操作,稍有不慎,鼠弟归天数据报销。
为啥又说不难呢?因为你要踩的坑,汉恒都帮你踩了!
汉恒动物实验组,专业填坑20年~汉恒不光讲给你听,而是立志把这些坑全拍成小电影show给你看!!
为了确保大家的动物实验顺利进行,汉恒整理了史上最全的AAV注射方法实验视频!
可至网站首页视频专区或者关注’汉恒生物‘公众号的视频专区查看
不单单是AAV,其他的drug,particle的注射方式也如出一撤,只要你需要做到动物实验,汉恒动物实验视频一定会对你有所帮助。建议大家关注汉恒公众号,随时查看汉恒最新实验视频。
我们的口号是:”课题生生不息,视频更新不止!“
来点干货吧!汉恒出品,必属精品!
汉恒多脏器AAV注射方式及注意点:
注射部位 | 汉恒推荐的血清型 | 注射方式 | 动物 | 注射体积( ul) | 备注 |
心脏 | AAV9 | 原位多点注射(局部) | 大鼠 | 10-15/点,5 个点 | 心肌主要有系统性给药、 原位给药和冠脉给药法,最常用的是前两种,冠脉法技术难度大,较少用。 **如需提高心肌特异性,您可配合使用汉恒筛选的心肌特异性启动子。 |
小鼠 | 10-15/点,3-5 个点 | ||||
尾静脉注射(系统性) | 大鼠 | 250(200g 体重) | |||
小鼠 | 100 | ||||
肝脏 | AAV8 | 尾静脉注射 | 大鼠 | 200(200g 体重) | 大多数病毒都有嗜肝性,因此肝脏也是所有脏器中最好感染的。肝脏也可以用门静脉注射,感染效果更好。 但门静脉注射需行动物手术,技术复杂且易造成创伤。 **如需提高肝脏特异性,您可配合使用汉恒筛选的肝脏特异性启动子。 |
AAV9 | 小鼠 | 100 | |||
全脑 | AAV-BBB | 尾静脉注射 | 大鼠 | 250-300 | 特殊血清型,可跨血脑屏障,感染全脑。 但经过汉恒验证,目前该血清型只适合大小鼠,在猴子上不成功。 **如需提高神经细胞特异性,您可配合使用汉恒筛选的神经特异性启动子,如pSyn,pCamKII,pGFAP等。 |
小鼠 | 100 | ||||
大脑(局部) | AAV9,AAV2,AAV5 | 立体定位注射 | 大鼠 | 1-5ul | 经汉恒验证,AAV9型感染扩散范围广, AAV2次之,AAV5扩散范围最小最集中 **如需提高神经细胞特异性,您可配合使用汉恒筛选的神经特异性启动子,如pSyn,pCamKII,pGFAP等。 |
小鼠 | 0.2-2ul | ||||
脊髓 | AAV5; AAV1;AAV9 | 鞘内注射 | 大鼠 | 5-10ul | 针头要足够细,找准椎骨之间空隙入针,避免损伤神经。 注射一定要缓慢,且控制好注射体积。 |
小鼠 | |||||
脂肪 | 汉恒脂肪特异性血清型 | 腹内脂肪-腹腔注射 | 大鼠 | 300 | 汉恒实验室自验证的脂肪特异性血清型 |
小鼠 | 150-200 | ||||
皮下脂肪-原位注射 | 大鼠 | 10-15/点,5-8个点 | |||
小鼠 | 10-15/点,5-8个点 | ||||
骨骼肌 | 9型 | 原位多点注射 | 大鼠 | 10-15/点,3-5个点 | 下针缓慢,注意深度, |
小鼠 | 10-15/点,3-5个点 | ||||
眼睛 | 汉恒AAV视网膜专用型 | 玻璃体腔注射 | 大鼠 | 3~5ul | 汉恒实验室自验证的视网膜特异性血清型 |
小鼠 | 1-2ul | ||||
AAV-DJ | 视网膜下腔注射 | 大鼠 | 3~5ul | ||
小鼠 | 1-2ul | ||||
肺脏 | 汉恒肺脏特异血清型 | 无创气管注射 | 大鼠 | 100-200ul(200g体重) | 需呼吸机。汉恒也测试过滴鼻法,效果不如气管注射。 |
小鼠 | 50-75 | ||||
肾脏 | 2型或9型 | 肾脏肾盂原位注射 | 小鼠 | 100ul | 较为复杂,方法详见汉恒公众号实验视频 |
肠道 | 1型或5型 | 灌肠 | 大鼠 | 1000ul(200g 体重) | 动物需要提前饥饿,排空肠道。病毒用量非常大。 |
小鼠 | 500ul | ||||
血管 (内皮为主) | 1型或5型 | 腹主动脉局部感染 | 大鼠 | 50ul | 局部感染30分钟,感染时需要clamped肾主动脉 |
4月8日-4月30日,AAV包装每满3999送300京东卡,也可在网站试用装专区申请试用
包括:心肌、肝脏、神经、肌肉、肺、肾、眼、内耳、胰腺等多组织特异性AAV试用装
- 浏览 12373 次