慢病毒包装完成后如何用慢病毒感染目的细胞

慢病毒包装完成后如何用慢病毒感染目的细胞

实验准备：将状态良好的细胞接种到6孔板

实验步骤：

1、从培养箱中取出接种细胞的6孔板，吸去原有培养基，加入新鲜培养基和Polybrene（如有需要），混匀后放入培养箱，37℃孵育30min

2、30min后，取出，同时从冰箱中取出慢病毒，缓慢冰融

3、将病毒液按不同MOI加入细胞中，混匀，37℃培养12h

4、12h后吸去含病毒的培养液，换上新鲜培养液，37℃培养48h

5、带GFP的病毒，通过荧光显微镜观察表达效率；

6、带Puromycin的病毒，换上适当浓度的Puromycin的新鲜培养液筛选稳定转导的细胞株