在细胞培养的时候,有时会在400倍显微镜下看到小黑点在做布朗运动,小黑点有时呈点状,有时呈小的片状,目前业内称之为黑胶虫。
黑胶虫污染一般来源于血清当中,在细胞培养的过程中,黑胶虫会随细胞的传代而不断增多,并且会与细胞竞争培养基中的营养物质。
在黑胶虫污染的早期对细胞并没有什么影响,但当黑胶虫的数量达到一定程度时,细胞就会因营养不足而死亡,严重影响科研活动的开展和进行。
有黑胶虫了怎么办?
①
换好一点的血清
②
如果是贴壁细胞的话,可用无菌的PBS洗几次,可一定程度上缓解。若是悬浮的话,可以向其中少加一点滋养细胞。加滋养细胞对有黑胶虫的刚复苏的细胞很有效!还有就是实验环境要注意好,保持细胞间整个环境的洁净度。
③
换用进口的一次性塑料培养瓶。
④
建议清理无菌室所有物品,重新灭菌,用KMnO4熏蒸,按首次使用无菌室做,细胞重新复苏。
⑤
在换液前先加入生理盐水并轻轻吹打,冲洗干净后再加入培养液,坚持天天洗,传代时加生理盐水再离心一次,接种密度稍大一些,虫子就会些许减少,对细胞的生长也不会有大的影响。
⑥
有材料称minocycline具有一定的作用,可以和换液结合起来使用。
⑦
加入汉恒新推出的黑胶虫去除剂CleanIt,只需要将试剂加入培养基,便可轻轻松松与黑胶虫说再见。
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