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在体敲除AAV-saCas9


AAV-SaCas9在体敲除技术服务

汉恒生物技术工程师运用CRISPR/Cas9基因敲除技术,将腺相关病毒与SaCas9结合,即AAV-SaCas9,可以实现高效在体基因敲除,也是最新最领先的在体基因敲除技术。 欲了解AAV不同的血清型及滴度请咨询全国免费服务热线:400-092-0065



AAV其他相关特色服务

1.      腺相关病毒AAV包装服务

2.    AAV在体自噬流检测服务

3.    AAV光遗传技术服务



AAV-SaCas9简介

最早在细菌中被发现,CRISPR-Cas9系统能够切割DNA,充当了对抗病毒感染的一个重要防御机制。尽管许多的微生物物种都拥有这一系统,研究人员优先选择改造了来自化脓链球菌的Cas9酶(SpCas9)来改变高等生物的DNA,并已成为一系列高度通用的基因组修饰技术的基础。

要想扰乱成体动物中的基因,必须要利用一些载体将CRISPR-Cas9系统的关键元件导入到细胞中。由于不会引起人类疾病并已在欧洲获得临床监管机构的批准,腺相关病毒(AAV)被视为是最有前景的候选载体之一。然而,AAV微小的负载能力使得同时包装SpCas9酶和其他基因编辑必需的元件进入到单个病毒颗粒中成为一个挑战。


麻省理工的科学家张峰研究员最新的研究发现一种来自金黄色葡萄球菌的Cas9核酸酶(SaCas9),它比SpCas9小25%,在AAV病毒的包装容量范围之内,从而为AAV的包装问题提供了一个解决方案。



Nature. 2015 Apr 9;520(7546):186-91



汉恒生物技术工程师运用CRISPR/Cas9基因敲除技术,将腺相关病毒与SaCas9结合,即AAV-SaCas9,可以实现高效在体基因敲除,也是最新最领先的在体基因敲除技术。并且可以根据动物靶器官,选择不同血清型的AAV(不同血清型AAV对各组织器官的亲和性见下表),是目前最有效的在体基因敲除技术。





AAV载体不同血清型


研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前汉恒生物在包装腺相关病毒时有12 中不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见表 1。



表1.12种不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性


    


AAV-SaCas9服务流程


    

参考文献

1、Laterodorsal tegmentum interneuron subtypes oppositely regulate olfactory cue-induced innate fear;
(2016年发表于Nature Neuroscience,作者:段树民)
2、LRP6 acts as a scaffold protein in cardiac gap junction assembly;
(2016年发表于Nature Communications,作者:陈义汉)
3、Characterization of fowl adenovirus serotype 4 circulating in chickens in China;
(2019年发表于Vet microbiology,作者:fanghua wei)
4、Long noncoding RNA HIF1A-AS2 facilitates cell survival and migration by sponging miR-33b-5p to modulate SIRT6 expression in osteosarcoma ;
(2019年发表于Biochem Cell Biology,作者:赵政旭)
5、Expression levels of microRNAs that are potential cytochrome P450 regulators in cynomolgus macaques;
(2019年发表于Xenobiotica,作者:Uno Y)




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