神经逆行标记AAV-Retro腺相关病毒技术手册
产品介绍:
人体的感知、运动等功能都和神经元的长距离信号传导密切相关。在科学研究中,如何高效标记和操作投射神经元一直是广大科研工作者所面对的难题。标记物在神经元中沿其轴突从胞体行末梢进行示踪为顺行标记,从末梢行胞体进行示踪的为逆行标记,而拥有逆行标记能力的研究工具比较缺乏。
根据最新发表在 Neuron 杂志的文章 “ A Designer AAV Variant Permits Efficient RetrogradeAccess to Projection Neurons”[1]中策略(图1),汉恒生物研发团队对AAV病毒外壳进行改造,成功构建了AAV-Retro神经逆行标记腺相关病毒,该病毒能被突触轴突末端吸收,并在神经元中进行逆行传递和全细胞表达。
图1. Tervo DG等研究证明脑桥基底核定位注射rAAV-Retro-DIO-CAG-tdtomato病毒可逆行感染投射至注射位点的皮层第五层Cre阳性投射神经元细胞
汉恒生物采用自包装神经逆行标记病毒AAV2/retro-EGFP病毒注射小鼠SNc(黑质致密部)部位,3周后取材切脑片检测其他脑区的荧光表达情况(图2)。发现在MGP(内侧苍白球)、LGP(外侧苍白球)、PFC(前额叶皮层)等部位可以检测到明显荧光表达,证明SNc神经元对MGP、LGP、PFC等区域均有大量投射。
汉恒实例:
图 2. 汉恒 AAV2/retro-EGFP 病毒注射小鼠 SNc部位可逆行标记至MGP、LGP、PFC部位
参考文献:
[1] Tervo DG, Hwang BY, Viswanathan S, Gaj T,Lavzin M, Ritola KD, et al. A Designer AAV Variant Permits Efficient RetrogradeAccess to Projection Neurons. Neuron. 2016;92(2):372-82.- 浏览 7250 次