细胞增殖检测快人一步：CCK8原理与方法

 

经典的细胞增殖和毒理学试验过去常采用MTT法,但是这种方法耗时不省力。已经被一种新的方法：CCK-8法所取代。它弥补了MTT的缺陷,是MTT的升级版细胞计数试剂盒。

 

CCK-8的英文全称是Cell Counting Kit-8，也就是进行细胞计数的一个盒子。那它的用途也就大致可以猜到，和细胞增殖、细胞毒性相关的实验都可以。

 

CCK-8法应用非常广泛，如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。

 

下面就正式来了解一下它的优势、实验原理吧

 

 

一、CCK-8方法的优势

 

CCK-8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

 

 

 

优势

 

1、酚红和血清对CCK-8法的检测不会造成干扰；

2、本试剂盒细胞毒性非常低，因此加入WST-8显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读数从而找到最佳测定时间。

 

 

二、实验原理

 

• CCK-8细胞增殖检测试剂盒是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性检测的快速灵敏度试剂盒。

• WST-8属于MTT的升级产品，工作原理为：在电子耦合试剂存在的情况下，WST-8可以被线粒体内的脱氢酶还原生成高度水溶性的橙黄色的甲臜产物（formazan）（图1-2） ，其颜色的深浅与存活细胞数目的增殖成正比，与细胞毒性成反比。使用酶标仪在450 nm波长处测定OD值，可以间接反映活细胞的数量。

 

 

 

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看了这么多，是不是对CCK-8有了更进一步的了解了呢？

 

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