动物活体基因调控全攻略（AAV注射方式及血清型推荐）

说起生物医药科研界的让人撕心裂肺的实验，动物实验肯定是其中一大块。裸鼠成瘤，各种疾病造（zuo）模（nie），让我们饱尝与鼠小弟的相爱相杀。

 

既然有牺牲，除了有尊严，还得有价值。如何让鼠小弟们的牺牲换来的数据逼格更高？自然少不了时下最火爆的动物体内基因转染技术，腺相关病毒（AAV）安全性高、免疫原性低，相对于基因工程小鼠成本低，周期短，风险小，非常适合用于活体动物的基因转导，并且AAV具有多血清型，可以靶向感染不同的组织器官，根据汉恒生物的多年经验汇总了不同组织器官的AAV血清型，注射方式，用量推荐。

 

汉恒多脏器AAV注射方式及注意点：

 

注射部位 汉恒推荐的血清型 注射方式 动物 注射体积（ ul） 备注
心脏 AAV9 原位多点注射（局部） 大鼠 10-15/点，5  个点 心肌主要有系统性给药、
   原位给药和冠脉给药法，最常用的是前两种，冠脉法技术难度大，较少用。
   **如需提高心肌特异性，您可配合使用汉恒筛选的心肌特异性启动子。
小鼠 10-15/点，3-5  个点
尾静脉注射（系统性） 大鼠 250（200g  体重）
小鼠 100
肝脏 AAV8 尾静脉注射 大鼠 200（200g  体重） 大多数病毒都有嗜肝性，因此肝脏也是所有脏器中最好感染的。肝脏也可以用门静脉注射，感染效果更好。
   但门静脉注射需行动物手术，技术复杂且易造成创伤。
   **如需提高肝脏特异性，您可配合使用汉恒筛选的肝脏特异性启动子。
AAV9 小鼠 100
全脑 AAV-BBB 尾静脉注射 大鼠 250-300 特殊血清型，可跨血脑屏障，感染全脑。
   但经过汉恒验证，目前该血清型只适合大小鼠，在猴子上不成功。
   **如需提高神经细胞特异性，您可配合使用汉恒筛选的神经特异性启动子，如pSyn，pCamKII，pGFAP等。
小鼠 100
大脑（局部） AAV9，AAV2，AAV5 立体定位注射 大鼠 1-5ul 经汉恒验证，AAV9型感染扩散范围广，
   AAV2次之，AAV5扩散范围最小最集中
   **如需提高神经细胞特异性，您可配合使用汉恒筛选的神经特异性启动子，如pSyn，pCamKII，pGFAP等。
小鼠 0.2-2ul
脊髓 AAV5;
   AAV1;AAV9		 鞘内注射 大鼠 5-10ul 针头要足够细，找准椎骨之间空隙入针，避免损伤神经。
   注射一定要缓慢，且控制好注射体积。
小鼠
脂肪 汉恒脂肪特异性血清型 腹内脂肪-腹腔注射 大鼠 300 汉恒实验室自验证的脂肪特异性血清型
小鼠 150-200
皮下脂肪-原位注射 大鼠 10-15/点，5-8个点
小鼠 10-15/点，5-8个点
骨骼肌 9型 原位多点注射 大鼠 10-15/点，3-5个点 下针缓慢，注意深度，
小鼠 10-15/点，3-5个点
眼睛 汉恒AAV视网膜专用型 玻璃体腔注射 大鼠 3~5ul 汉恒实验室自验证的视网膜特异性血清型
小鼠 1-2ul
AAV-DJ 视网膜下腔注射 大鼠 3~5ul
小鼠 1-2ul
肺脏 汉恒肺脏特异血清型 无创气管注射 大鼠 100-200ul（200g体重） 需呼吸机。汉恒也测试过滴鼻法，效果不如气管注射。
小鼠 50-75
肾脏 2型或9型 肾脏肾盂原位注射 小鼠 100ul 较为复杂，方法详见汉恒公众号实验视频
肠道 1型或5型 灌肠 大鼠 1000ul（200g  体重） 动物需要提前饥饿，排空肠道。病毒用量非常大。
小鼠 500ul
血管
   （内皮为主）		 1型或5型 腹主动脉局部感染 大鼠 50ul 局部感染30分钟，感染时需要clamped肾主动脉

 

 

除了不同的血清型靶向感染动物组织外，汉恒生物还研发了特异性启动子和特异性血清型，可实现动物活体的基因精准定向递送。

 

 

 

in vivo基因转导的工具小恒帮您搞定了，然而多脏器注射对操作的要求高，稍有不慎，鼠弟归天数据报销。不过贴心的小恒已经准备了史上最全的动物实验注射视频，为您的动物实验保驾护航！

 

想要查看全部注射视频，请至汉恒公众号-微官网-实验视频。

 

 

不单单是AAV，其他的drug，particle的注射方式也如出一撤，只要你需要做到动物实验，汉恒动物实验视频一定会对你有所帮助。建议大家关注汉恒公众号，随时查看汉恒最新实验视频。

 

 

 

 

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