无创气管注射

1、麻醉-皮下注射麻醉剂 Xylazin/Ketamine 混合液（10mg/kg, 100 mg/kg ）（Xylazin/Ketamine，Sigma-Aldrich X1251, K2753）。

2（可选）、在小鼠的眼睛上涂上眼药膏（Oculentum simplex， Teva Pharmachemie），防止眼睛干掉。

3、正式插管之前可以通过解剖一只小鼠确定插管的位置。对于黑色成年鼠（25g）来说，插入的参考距离是约1.5 cm。

4、把麻醉好的小鼠固定到一个约60°的斜面上，腹部朝上。用细绳固定下小鼠牙齿，防止头部晃动太大。

5、小心打开小鼠嘴部，用平头镊子轻轻把小鼠舌头外拉。用Exel Safelet IV 留置针（24G）慢慢插入气管（注意距离，~1.5 cm）。然后轻轻把针头拔出。

6、将75微升的病毒（或无菌PBS/生理盐水对照）注入留置针顶端，让小鼠慢慢吸入肺部，一定要控制病毒的体积，防止呛死小鼠。

7、实验完毕需要保持小鼠身体足够温暖（比如37度加热灯、温箱等），以利于苏醒。