肾脏肾盂注射

1、麻醉-皮下注射麻醉剂 Xylazin/Ketamine 混合液（10mg/kg, 100 mg/kg ）（Xylazin/Ketamine，Sigma-Aldrich X1251, K2753）。

2、把小鼠一侧（如左侧）的毛剃掉。

3、在小鼠的眼睛上涂上眼药膏（Oculentum simplex， Teva Pharmachemie），防止眼睛干掉。

4、把待注射病毒100微升吸入0.5 ml U-100胰岛素注射器（29G针头）【注射器的选择及其关键】，待用。

5、手术暴露小鼠左侧肾脏。用手术夹夹住小鼠裸漏皮肤，选择距离小鼠胸腔下方和脊椎各1 cm的地方剪开约0.5 cm长的伤口。（放个示意图）

6、用手指小心曝露出肾脏以周围的脂肪组织，轻轻扒开脂肪暴漏肾盂。肾盂应位于肾脏中间，为淡黄色透明/白色小点。

7、注射的时候注意插针位置，要避开肾静脉、动脉以及输尿管，插针深度在0.5cm左右。100微升病毒要在2-3秒内注射完成，速度很关键！太慢无法引起逆流，会极大影响感染效率。

8、注射完成等待2-3秒拔针，然后小心把肾脏归位，缝合伤口。实验完毕需要保持小鼠身体足够温暖（比如37度加热灯、温箱等），以利于苏醒。