无缝克隆试剂盒HB-infusion(TM)

一、产品简介

HB-infusionTM无缝克隆试剂盒是一种新型、快速并且高效的Gibson Assembly DNA定向克隆技术，可以在任意载体的任意位置一次插入多个目的基因片段。HB-infusionTM无缝克隆试剂盒操作极其简单，仅需在载体的克隆位点进行线性化，并在插入片段PCR引物的5’端引入与载体克隆位点两端完全一致的15~25 bp同源序列（图1，图3）。将上述线性化的克隆载体和带有同源序列的PCR片段按合适比例混合，并加入HB-infusionTM Master mix，通过反应体系中DNA外切酶、DNA聚合酶以及连接酶的在50℃反应20 min即可快速完成定向克隆，阳性率几近100%。

图1. HB-infusionTM快速克隆试剂盒原理示意图。1. 线性化目的载体（左上）；2. PCR获取目的片段。设计的引物５’需要和线性化载体末端有15~25 bp的重叠（图中蓝色和黄色片段，细节可参考图3）；3. 按照一定比例把二者混合在HB-infusionTM的2´预混液内，50°C反应20 min后直接转化E.coli即可。

二、HB-infusionTM试剂盒的优点

1. 相比于传统的同源重组的无缝克隆方法进行，HB-infusionTM 试剂盒更高效，操作更简单，只需要一次反应即可完成定向克隆；

2. 对酶切位点无要求，可以把目的片段插入到任意载体的任意位点；

3. 连接片段之间不会引入任何其他序列；

4. 可以同时克隆多个片段。

三、产品包装

产品组成：