QPCR检测

qPCR背景介绍

在实时荧光定量PCR中，对每一轮循环的荧光信号强度进行监测并记录，随着反应的进行，监测到的荧光信号可以绘制成一条曲线，即为扩增曲线。一般而言，扩增曲线可以分成三个阶段：基线期（Baseline phase），指数增长期（Log-linear phase）和平台期（Plateau phase）（图一）。在扩增早期即基线期，扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖，无法判断产物量的变化。在平台期，扩增产物已不再呈指数级的增加，PCR的终产物量与起始模板量之间无线性关系，所以根据最终的PCR产物量不能计算出初始模板量。只有在荧光信号指数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，可在此阶段进行定量分析。

流程图

汉恒提供服务项目

汉恒生物科技（上海）有限公司提供从引物设计，细胞或者组织样品处理，qPCR检测以及完整的数据报告等服务。为您提供最优质的服务，为您的科研保驾护航。

客户提供：

1.细胞：细胞数10⁶-10⁷；组织：总量>100mg；DNA或RNA样品：总量>2 μg

2.靶基因信息：包括基因序列或GenBank 登录号等

3.背景资料：包括生物物种信息、基因功能、用途、特性、DNA/RNA 来源等

（备注：请在送样前，与技术确认具体送样情况。）

实例展示：

（Hou Z ,Qin X ,Hu Y ,et al. 2019）

在研究长期锻炼保护心脏的分子机制中，研究人员对运动大鼠(Exe-exo)和久坐大鼠(Sed-exo)的外泌体进行miRNA-seq和qPCR，来确定研究目标与心脏保护相关的miR-342 5p。

参考文献：

Hawkins, S. F. C, Guest, P. C. Multiplex Analyses Using Real-Time Quantitative PCR[J]. Methods in Molecular Biology,2016,1546:125-133.

Wong M L , Medrano J F . Real-time PCR for mRNA quantitation[J]. BioTechniques, 2005, 39(1):75-85

Hou Z , Qin X , Hu Y , et al. Longterm Exercise-Derived Exosomal miR-342-5p: A Novel Exerkine for Cardioprotection[J]. Circulation Research, 2019,124(9):1386-1400.